- història
- Per a què serveix el reactiu de Benedict?
- Detecció de glucosa en l'orina
- Coloració de la solució
- Detecció de diversos monosacàrids i disacàrids
- components
- Procediment d'ús
- Reacció de el test de Benedict
- Preparació de l'reactiu de Benedict
- referències
El reactiu de Benedict és una dissolució blavosa de coure que s'utilitza per detectar la presència de sucres reductors: aldehids, alfa-hidroxi-cetones i hemicetales. Va ser desenvolupat per Stanley R. Benedict (1884-1936).
Els sucres alfa-hidroxi-cetones es caracteritzen per posseir un grup hidroxil a la adjacència de la cetona. Mentrestant, un hemicetal és un compost que resulta de l'addició d'un alcohol a un aldehid o cetona. El reactiu de Benedict reacciona indiscriminadament amb tots aquests sucres reductors.
Les coloracions dels tubs d'assaig després d'afegir-los el reactiu de Benedict permet saber semi quantitativament quants sucres reductors hi ha dissolts. Font: Thebiologyprimer
El mètode de Benedict està basat en l'acció reductora dels sucres sobre el Cu 2+, de coloració blau, que el transforma en Cu +. El Cu + forma un precipitat vermell-maó d'òxid cuprós. No obstant això, depenent de la concentració dels sucres van apareixent un espectre de colors (imatge superior).
Cal notar que si s'afegeix el reactiu de Benedict a un tub d'assaig sense sucres reductors (0%), aquest no experimenta cap canvi de la seva coloració blavosa. Així, quan la concentració és superior a 4%, el tub d'assaig es tenyeix d'un color marró.
història
El reactiu va ser creat pel químic nord-americà Stanley Rossiter Benedict el 1909, qui va publicar el seu article científic A Reagent for detection of Reducing Sugars, a la revista J. Biol. Chem.
A més, Lewis i Benedict (1915) van publicar un mètode per a la determinació de sucres reductors en sang, usant com a indicador a l'picrato; però va deixar d'usar-se per la seva falta d'especificitat.
El reactiu de Benedict és molt semblant a el de Fehling. Es diferencien que Benedict utilitza el ió citrat i la sal carbonat de sodi; mentre Fehling empra l'ió tartrat i hidròxid de sodi.
La prova de Benedict és qualitativa, és a dir, només detecta la presència de sucres reductors. No obstant això, el reactiu de Benedict pot ser quantitatiu si posseeix tiocianat de potassi en solució, el qual forma un precipitat blanc de tiocianat de coure que pot ser valorat mitjançant l'ús de patrons de glucosa.
Per a què serveix el reactiu de Benedict?
Detecció de glucosa en l'orina
El reactiu de Benedict encara és utilitzat per detectar la presència de glucosa en l'orina i és un indici de la malaltia de diabetis en el pacient, la orina és sotmesa a la prova o test de Benedict. Encara que, no pot descartar-se que la glucosúria tingui un origen diferent.
Per exemple, es troba la glucosúria augmentada en condicions tals com: embaràs, glucosúria renal primària, acidosi tubular renal, síndrome de Fanconi primari o secundari, hiperaldosteronisme i pancreatitis aguda o càncer de pàncrees.
El reactiu de Benedict és de coloració blava a causa de la presència de Cu 2+, el qual és reduït a Cu + per l'acció dels sucres reductors; en aquest cas, la glucosa, formant-se un precipitat d'òxid de coure (I) de color vermell maó.
Coloració de la solució
La coloració i la formació de l'precipitat en la prova de Benedict aplicada a l'orina varia en funció de la concentració de l'sucre reductor. Si la concentració de glucosa a l'orina és menor a 500 mg / dl, la solució adquireix una coloració verda i no hi ha formació de precipitat.
La concentració de glucosa en l'orina de 500-1000 mg / dL origina un precipitat de color verd a la prova de Benedict. A una concentració major de 1.000 a 1.500 mg / dl, provoca la formació d'un precipitat groc.
Si la concentració de glucosa és de 1500-2000 mg / dl, es veurà la formació d'un precipitat ataronjat. Finalment, una concentració de glucosa en orina és major a 2.000 mg / dl, provocarà la formació d'un precipitat de color vermell maó.
Això assenyala que la prova de Benedict té un caràcter semiquantitatiu i es Reporta el resultat recorrent a creus. Així per exemple, a la formació d'un precipitat verd li correspon una creu (+); ia la formació d'un precipitat vermell maó, li corresponen quatre creus (++++).
Detecció de diversos monosacàrids i disacàrids
El reactiu de Benedict detecta la presència de sucres reductors que posseeixen un grup funcional lliure o un grup funcional cetona lliure, com a part de la seva estructura molecular. Aquest és el cas de glucosa, galactosa, manosa i fructosa (monosacàrids), així com la lactosa i la maltosa (disacàrids).
La sacarosa i el midó no reaccionen amb el reactiu de Benedict per tenir grups reductors lliures. A més, hi ha compostos que interfereixen en la prova de Benedict en l'orina, donant falsa positivitat; tal és el cas de l'salicilat, penicil·lina, estreptomicina, levodopa, àcid nalidíxic i isoniazida.
Hi ha químics presents en l'orina que poden reduir la reacció de Benedict; per exemple: la creatinina, el urat i l'àcid ascòrbic.
components
Els components de l'reactiu de Benedict són els següents: sulfat de coure pentahidratat, carbonat de sodi, citrat trisòdic i aigua destil·lada.
El sulfat de coure pentahidratat, CuSO 4 · 5H 2 O, conté el Cu 2+: és el compost que li dóna la coloració blava a l'reactiu de Benedict. Els sucres reductors actuen sobre el Cu 2+, produint la seva reducció a Cu + i la formació d'un precipitat d'òxid cuprós (Cu 2 O) de color vermell maó.
El carbonat de sodi genera un medi alcalí, necessari perquè es doni la reducció de l'coure. El carbonat de sodi reacciona amb l'aigua, generant bicarbonat de sodi i l'ió hidroxil, OH -, responsable de l'alcalinitat de l'mig necessària perquè es produeixi el procés reductiu.
El citrat de sodi forma un complex amb el coure (II) que evita que aquest experimenti durant el seu emmagatzematge una reducció a Cu (I).
Procediment d'ús
Es col·loquen 5 ml de el reactiu de Benedict en un tub d'assaig 20 x 160 mm i se li afegeix 8 gotes d'orina. S'agita suaument el tub d'assaig i es col·loca en un recipient amb aigua bullint durant 5 - 10 minuts.
Transcorregut aquest temps, es treu el tub de l'bany d'aigua calenta i es refreda la seva superfície amb aigua corrent per tenir finalment la lectura de l'resultat obtingut a l'realitzar el test de Benedict (els colors).
Reacció de el test de Benedict
La reducció de l'Cu (II) durant el test de Benedict es pot esquematitzar de la manera següent:
RCHO + 2 Cu 2+ (en complex) + 5 OH - => RCOO - + Cu 2 O + 3 H 2 O
RCHO = aldehid; RCOO - = (ió carboxilat); Cu 2 O = òxid cuprós, un precipitat de color vermell maó.
Preparació de l'reactiu de Benedict
Es pesen 173 grams de citrat sòdic i 100 grams de carbonat de sodi i es dissolen conjuntament en 800 ml d'aigua destil·lada tèbia. Si s'observa restes de les substàncies no dissoltes, ha de filtrar la solució.
D'altra banda, es dissolen 17,3 grams de sulfat cúpric pentahidratado en 100 ml d'aigua destil·lada.
Posteriorment, es barregen suaument les dues solucions aquoses i es continua amb agitació permanent, completant a 1.000 ml amb aigua destil·lada.
referències
- Graham Solomons TW, Craig B. Fryhle. (2011). Organic Chemistry. Amines. (10 th edition.). Wiley Plus.
- Clark J. (2015). Oxidation of aldehydes and cetones. Recuperat de: chemguide.co.uk
- Wikipedia. (2020). Benedict 's Reagent. Recuperat de: en.wikipedia.org
- Editorial team. (9 gener 2019). Benedict 's Test: Principle, Reagent Preparation, Procedure and Interpretation. Recuperat de: laboratoryinfo.com
- Dr. Whitson. (Sf). Benedict 's Reagent: A Test for Reducing Sugars. Recuperat de: nku.edu