MITJANS DE CULTIUS SELECTIUS: FONAMENT, SÒLIDS I LÍQUIDS - BIOLOGIA - 2025

Els mitjans de cultius selectius són aquells agars i vins que serveixen per a l'aïllament d'un grup definit de microorganismes, mentre inhibeixen el desenvolupament d'altres. Són ideals per sembrar mostres polimicrobianes, permetent recuperar el patogen buscat entre la microbiota acompanyant.

Hi ha una gran varietat de mitjans selectius, entre sòlids i líquids. Alguns van destinats a l'aïllament de bacteris Gram positives, com ara Staphylococcus coagulasa positius, Lactobacillus, Bifidobacteris, etc.

Mitjans de cultius selectius. Font: Air1404

Altres per a la recuperació de patògens Gram negatius, com ara espècies dels gèneres Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas, entre d'altres.

Així com també n'hi ha per afavorir el creixement de fongs i llevats, com ara espècies de Candida, Histoplasma, Cryptococcus, dermatòfits, entre d'altres.

Cal destacar que alguns mitjans enriquits no selectius poden convertir-se en selectius amb l'addició d'antibiòtics. Així mateix, alguns mitjans de cultius poden ser selectius i diferencials a el mateix temps.

D'altra banda, hi ha mitjans de cultius líquids selectius; alguns poden servir com a mitjans d'enriquiment, afavorint l'exacerbació d'un grup selectiu de bacteris, mentre suprimeix el d'altres.

Els mitjans de cultiu selectius són àmpliament utilitzats en els laboratoris de microbiologia per a l'anàlisi de diversos tipus de mostra; així com també per a l'aïllament d'una gran varietat de microorganismes d'interès clínic, industrial, ambiental i alimentari.

fonament

Els mitjans de cultius selectius es fonamenten en contenir substàncies nutritives que afavoreixin el creixement d'un bacteri o fong específic o d'un grup determinat d'aquests, i a el mateix temps han de contenir substàncies inhibidores que no permetin el desenvolupament d'altres microorganismes no desitjables.

Entre les substàncies nutritives que poden contenir es troben: digerit pancreàtic de caseïna, extracte de llevats, polipeptonas, entre d'altres.

Entre les substàncies inhibidores es troben: antibiòtics, sals biliars, verd brillant, cristall violeta, fucsina bàsica, eosina, blau de metilè, desoxicolato sòdic, sulfit sòdic, monoleato de sorbitan, citrat d'amoni, cetrimida, clorur de liti, telurito de potassi, verd de malaquita, entre d'altres.

En ocasions els mitjans poden ser tant selectius, com diferencials. Així mateix, el grau de selectivitat varia d'un mitjà a un altre.

Alguns són altament selectius, caracteritzats per posseir condicions extremes d'hostilitat per la majoria dels microorganismes i on només un petit nombre d'espècies són capaços de suportar les condicions presents en el medi i per tant creixen satisfactòriament. Per exemple, l'agar TCBS i l'agar MRS, entre d'altres.

Com a, altres són mitjanament selectius, és a dir, aquells que inhibeixen a un grup específic de microorganismes, com ara als bacteris Gram positives. D'altra banda, afavoreixen el creixement d'una gran varietat de bacteris Gram negatives; per exemple, l'agar Mac Conkey.

Finalment, hi ha mitjans de cultius amb un baix poder selectiu, és a dir, són aquells que permeten el creixement d'una gran varietat de bacteris entre Gram positius i Gram negatius, així com també d'alguns llevats, mentre inhibeixen només un petit grup de microorganismes. Exemple: l'agar EMB.

Mitjans de cultiu sòlids selectius

Agar Baird-Parker

Medi dissenyat per a la detecció de estafilococs coagulasa positius (Staphylococcus aureus). Conté com a substàncies inhibidores clorur de liti i telurito de potassi.

Agar BCYE o agar tamponat d'extracte de llevat i carbó

És un mitjà de cultiu molt enriquit, especialment per a l'aïllament d'espècies de Legionellas i Nocardias. Aquest mitjà es torna selectiu amb l'addició d'antimicrobians com ara polimixina B, vancomicina i anisomicina.

Agar BHI amb antibiòtics

L'agar BHI originalment és un mitjà enriquit, però si se li afegeix cloramfenicol i cicloheximida és ideal per a l'aïllament selectiu de fongs d'interès clínic.

agar Biggy

Medi selectiu i diferencial per a l'aïllament d'espècies de Candida. Conté citrat d'amoni, bismut i sulfit de sodi, que actuen com a inhibidors de l'creixement bacterià.

Agar Bordet Gengou

Medi de cultiu enriquit i selectiu, especialment per a l'aïllament de B ordetella pertussis i Bordetella parapertussis. Conté cefalexina per inhibir la flora acompanyant.

Agar Campy amb sang

Mitjà utilitzat per a l'aïllament de l'gènere Campylobacter. Conté cefoperazona, vancomicina i amfotericina B per inhibir el creixement de bacteris Gram negatives, Gram positives i fongs.

Agar Campylobacter Butzler

Medi especial per a l'aïllament d'espècies de l'gènere Campylobacter. Està suplementat amb sang de cavall, entre d'altres nutrients. També conté diverses substàncies inhibidores, com ara novobiocina, colistina, cefazolina, bacitracina i cicloheximida.

Agar Campylobacter Skirrow

Medi selectiu per a l'aïllament d'espècies de Campylobacter. Conté sang de cavall i altres nutrients. Com substàncies inhibidores conté vancomicina, polimixina B i trimetoprim.

Agar CCF o agar fructosa, cicloserina, cefoxitina

Com el seu nom indica, conté cicloserina i cefoxitina com a substàncies inhibidores i és utilitzat per a l'aïllament de Clostridium diffcile en mostres de femta, entre d'altres mostres intestinals.

agar cetrimida

Medi selectiu, dissenyat per a l'aïllament de Pseudomonas aeruginosa, afavorint la producció de pigments. La cetrimida (bromur de cetil trimetil amoni) és la substància que inhibeix el creixement d'altres bacteris diferents a P. aeruginosa.

Agar xocolata amb isovitalex i vancomicina

Aquest mitjà originalment és molt enriquit. L'addició de vancomicina és útil per a l'aïllament selectiu de soques de Neisseria gonorrhoeae i N. meningitidis.

Agar CIN o agar cefsulodina, irgasán, novobiocina

És un mitjà de cultiu mitjanament selectiu per a l'aïllament d'espècies de Yersinia.

Agar CNA (colistina, àcid nalidíxic)

És un medi selectiu especial per aïllament de bacteris Gram positives com Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus i llevats, però inhibeix el desenvolupament de bacteris Gram negatives com Pseudomonas i espècies de la família Enterobacteriaceae.

El agar Czapek

Medi dissenyat per al cultiu de bacteris i fongs sapròfits. Aquest mitjà conté nitrogen de tipus inorgànic. Per aquest motiu aquest mitjà es considera selectiu, ja que només podran desenvolupar microorganismes capaços d'utilitzar compostos inorgànics com a única font de nitrogen.

agar EMB

Medi lleugerament selectiu i diferencial, utilitzat per a l'aïllament d'enterobacteris. Escherichia coli és especialment detectada en aquest mitjà pel color negre verdós brillant de les seves colònies. El grau de selectivitat que posseeix és causa de la presència dels colorants anilínicos (eosina i blau de metilè).

agar Endo

Medi mínimament selectiu i diferencial, utilitzat per a l'aïllament i diferenciació de bacils Gram negatius fermentadors i no fermentadors de la lactosa pertanyents a la família Enterobacteriaceae ia altres famílies.

El sulfit sòdic i la fucsina bàsica inhibeixen a la majoria dels bacteris Gram positives. Escherichia coli en aquest mitjà produeix colònies característiques de color vermell fosc amb una lluentor metàl·lica verdós tornassolat.

agar Hektoen

Medi selectiu i diferencial per a l'aïllament de bacteris enteropatògenes dels gèneres Shigella i Salmonella. Com substància inhibidora conté sals biliars, suprimint el desenvolupament de bacteris Gram positives i algunes Gram negatives.

Agar Löwenstein-Jensen

Medi especialment dissenyat per a l'aïllament i desenvolupament de bacteris de l'gènere Mycobacterium, especialment l'espècie tuberculosi, entre d'altres.

El medi conté verd de malaquita; aquesta substància inhibeix la flora acompanyant Gram positiva i Gram negativa que hagin pogut resistir a la desinfecció prèvia de la mostra. També conté glicerina que estimula el creixement de M. tuberculosi, però inhibeix el desenvolupament de M. bovis i d'altres microorganismes.

Agar Mac Conkey

És un medi selectiu i diferencial. S'utilitza per a l'aïllament de bacils Gram negatius no exigents, fermentadors i no fermentadors de la lactosa.

El seu caràcter selectiu es el proporciona la presència de sals biliars i cristall violeta. Aquestes substàncies inhibeixen el creixement de bacteris Gram positives i alguns bacils Gram negatius exigents.

Agar manitol salat

Agar selectiu i diferencial per a l'aïllament de Staphylococcus aureus. Aquest mitjà té una alta concentració de clorur de sodi que inhibeix el creixement de la majoria dels bacteris.

agar SS

Medi moderadament selectiu i diferencial per a l'aïllament dels gèneres Salmonella i Shigella. El medi conté substàncies inhibidores, com ara sals biliars, citrat de sodi i verd brillant. Aquestes substàncies suprimeixen el creixement de bacteris Gram positives, certs bacteris Gram negatives i alguns coliformes.

Agar Regan Lowe

Agar selectiu per a l'aïllament de Bordetella pertussis. El medi conté carbó, cefalexina i amfotericina B com substàncies inhibidores.

agar SABHI

Medi selectiu per a l'aïllament de fongs patògens, com ara dermatòfits, Blastomyces dermatitidis i Histoplasma capsulatum. Conté cloramfenicol.

Agar sang de cavall amb bacitracina

Medi especial per a l'aïllament d'Haemophilus influenzae. La bacitracina inhibeix la flora acompanyant.

Agar sang de cavall amb carbó

Medi selectiu útil per recuperar ceps de Bordetella pertussis i B. parapertussis a partir de mostres clíniques. Conté cefalexina per inhibir la flora acompanyant.

Agar sang kanamicina-vancomicina (KV)

Medi selectiu, especial per a l'aïllament de bacteris anaerobis, com ara Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium i Veillonella.

Agar sulfit de bismut

Medi selectiu per a l'aïllament de Salmonella enterica subgrup enterica serotip Typhi. Aquest mitjà conté sulfit de bismut i verd brillant per inhibir el creixement de microorganismes Gram positius i de certs bacteris Gram negatives.

Agar TCBS (tiosulfat, citrat, sals biliars)

Medi altament selectiu per a l'aïllament d'espècies de l'gènere Vibrio. Conté citrat de sodi, bilis de bou i un pH alcalí que inhibeix la flora acompanyant.

Agar Thayer-Martin

Medi altament nutritiu i selectiu per a l'aïllament de Neisseria meningitidis i Neisseria gonorrhoeae. La flora acompanyant s'inhibeix per la presència de vancomicina, colistina i nistatina.

Agar verd brillant

Medi selectiu per a l'aïllament de soques de el gènere Salmonella. Com el seu nom indica, conté verd brillant com a substància inhibidora. Aquesta impedeix el desenvolupament dels bacteris Gram positives i un gran nombre de microorganismes Gram negatius.

Agar Vogel-Johnson

És un mitjà de cultiu selectiu i diferencial, formulat per l'aïllament de Staphylococcus aureus i inhibeix el creixement de bacteris Gram negatives i fins i tot algunes Gram positives. Les substàncies inhibidores són el telurito de potassi, el clorur de liti i la glicina.

agar XLD

És un medi selectiu i diferencial per a l'aïllament de enteropatògens Salmonella i Shigella. El desoxicolato sòdic li brinda el caràcter selectiu a l'mig.

CHROMagar (Candida Medium)

És un medi selectiu i diferencial per ajudar a l'aïllament i identificació d'espècies de Candida. El medi conté cloramfenicol per inhibir el desenvolupament de bacteris.

Medi Ellinghausen McCulough Johnson i Harris (EMJH)

Medi selectiu per al cultiu de leptospiras. Conté polisorbat 80, que inhibeix el creixement de la majoria dels bacteris.

Mitjans de cultiu líquids selectius

Caldo BHI NaCl 6,5%

Brou selectiu per a recuperació d'Enterococcus. L'alta concentració de clorur de sodi inhibeix el creixement de la microbiota acompanyant.

caldo EC

Caldo selectiu per a la recuperació de coliformes fecals i totals. Conté sals biliars que inhibeixen el creixement d'altres microorganismes.

caldo GN

Caldo selectiu per a la recuperació de Salmonella i Shigella. Conté citrat de sodi i desoxicolato sòdic, que inhibeixen als bacteris Gram positives i als coliformes.

Caldo Rappaport-Vassiliadis

És un mitjà d'enriquiment selectiu d'espècies de Salmonella. Conté verd de malaquita com a substància inhibidora.

caldo selenito

És un mitjà de cultiu selectiu, útil per a l'enriquiment de mostres en on se sospita la presència de bacteris enteropatògenes de l'gènere Salmonella.

Com el seu nom indica, conté selenito de sodi com a substància inhibidora, suprimint el creixement de bacteris Gram positives i de la majoria dels bacteris de l'tracte gastrointestinal.

caldo tetrationat

Caldo selectiu per a l'enriquiment i recuperació de soques de el gènere Salmonella.

El tetrationat format per la reacció generada entre el tiosulfat de sodi i la solució iodurada present en el medi inhibeix el creixement de coliformes i afavoreix el desenvolupament de bacteris que contenen l'enzim tetrationat reductasa (Salmonella).

També conté sals biliars i algunes varietats inclouen el verd brillant; ambdues substàncies inhibeixen a la majoria dels bacteris Gram positives i algunes Gram negatives (coliformes).

Caldo tioglicolat Campy

Brou especial per afavorir el desenvolupament de C. jejuni subsp jejuni. Conté amfotericina B, cefalotina, polimixina B, trimetropim i vancomicina.

Caldo Todd-Hewitt amb sang i antibiòtics

Serveix per enriquir les mostres i afavorir el desenvolupament de Streptococcus agalactiae de secrecions vaginals. Com substàncies inhibidores conté àcid nalidíxic i gentamicina o colistina.

referències

1. Microbiologia clínica mitjans de cultiu (curs 2012-2013). Disponible a: asignatura.us.es
2. Laboratoris BD. Agar Campylobacter Skirrow i Agar Campylobacter Butzler. 2013. Disponible a: bd.com
3. Laboratoris IVD. Löwenstein-Jensen. 2011. Disponible a: bio-rad.com
4. Laboratoris Neogen. Caldo GN (Hajna). Disponible a: foodsafety.neogen.com
5. Laboratoris BD. CHROMagar. Candida Medium 2014. Disponible a: bd.com
6. Laboratoris BD. Rappaport Vassiliadis Broth. 2003. Disponible a: bd.com
7. Portal Web Lifeder.com. Disponible a: Lifeder.com
8. Laboratoris BD. Leptospira Medium Base EMJH2011.Disponible a:
9. Köneman I, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnòstic Microbiològic. 5ta ed. Editorial Panamericana SA Argentina.
10. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnòstic Microbiològic de Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana SA Argentina.