HEMOCULTIU: PER A QUÈ SERVEIX, FONAMENT, PROCEDIMENT, RESULTATS - BIOLOGIA - 2025

L' hemocultiu és una prova bacteriològica que busca detectar la presència de microorganismes en la sang. La sang és un líquid estèril per naturalesa i així s'ha de mantenir en condicions fisiològiques, de manera que la presència de bacteris o fongs a la sang és sempre patològica.

Quan els bacteris o fongs es troben a la sang, però la multiplicació no supera l'eliminació dels microorganismes per part de sistema immunològic, s'anomena bacterièmia (per bacteris) o Fungemia (per fongs); però si els microorganismes augmenten incontrolablement en nombre, es denomina septicèmia.

Pots de hemocultius (groc: aerobiosi pediàtric, verd: aerobiosi adult i vermell: anaerobiosi adult). Font: fotografia presa per l'autora MSc Marielsa Gil.

Les bacterièmies, fungemias i septicèmies posen en perill la vida de l'pacient i per tant han de ser tractades de forma immediata. És per això que, quan hi ha sospita d'infecció a la sang, els metges demanen l'estudi de hemocultiu.

Aquesta anàlisi bacteriològica permet saber si hi ha o no una infecció a la sang i quin és el microorganisme involucrat. A més, si surt positiu es fa la prova de sensibilitat per saber que antibiòtic o antifúngic podria utilitzar-se en el tractament.

Si per contra el hemocultiu és negatiu a les 24 hores d'incubació, no s'ha de descartar fins que compleixi 240 hores negatiu. Això assegura que no hagin microorganismes de creixement lent.

Perquè un hemocultiu sigui fiable s'han d'adoptar mesures extremes d'asèpsia en la presa de mostra, i per augmentar la fiabilitat i sensibilitat de la prova s'han de prendre a mínim dues mostres durant el pic febril o proper a aquest.

Per a què serveix?

La sang és un líquid estèril i quan es troben microorganismes en ella és 100% patològic. Aquesta situació representa un quadre clínic molt delicat que compromet la vida de l'pacient.

L'hemocultiu és un important anàlisi bacteriològica que permet detectar la presència de microorganismes en el torrent sanguini.

Els microorganismes poden arribar a la sang per diferents vies, podent ser ser infeccions extravasculars com ara: pneumònies, infeccions intra-abdominals, pielonefritis, infeccions greus de la pell, teixits tous o artritis, entre d'altres.

O també pot ser per via endovenosa, exemple contaminació de catèters intravenosos o arterials, endocarditis, pràctica de drogoaddicció per via endovenosa, administració de medicaments o solucions contaminats, etc.

Detectar i tractar a temps a l'agent causal de la sèpsia és indispensable per garantir la supervivència de l'pacient.

En aquest sentit, el metge ha d'indicar la realització d'un hemocultiu quan observi signes i símptomes que facin sospitar d'una septicèmia, com ara: febre (major a 38 ° C) sense un focus infecciós aparent o per contra hipotèrmia (<de 36 ° C).

Altres signes poden ser: calfreds, augment de l'comptatge de leucòcits (> 10.000 cèl·lules / mm ³) o disminució important dels polimorfonuclears (<de 1.000 PMN / mm ³). Així com també deterioraments multiorgànics o pèrdua de la vitalitat de forma sobtada, entre d'altres signes d'alarma.

Les bacterièmies poden ser constants, transitòries o intermitents. Això és important per a la presa de mostra, ja que cal prendre-la quan hi hagi major probabilitat de trobar a l'microorganisme circulant.

Per això es recomana prendre a l'almenys 2 mostres en llocs diferents. A més l'ideal és que la presa de mostra es realitzi en els pics febrils o quan el pacient presenti tremolors, hipotèrmia extrema, sudoració o taquicàrdia.

No obstant això, perquè el hemocultiu sigui una eina realment útil, s'ha de prendre la mostra amb molta cura. Una mala manipulació o mala asèpsia a l'hora de prendre la mostra pot invalidar la prova, obtenint falsos positius.

fonament

L'estudi consisteix a prendre dues o tres mostres de sang de forma asèptica i col·locar-la en flascons especials.

Els dispositius especials per al cultiu de les mostres de sang es denominen flascons d'hemocultius. Aquests es classifiquen en:

Segons l'edat de l'pacient

Ús pediàtric

-Per adults.

Segons el tipus de microorganisme

-Frascos per microorganismes aerobis (bacteris aerobis, bacteris facultatives i fongs).

-Frascos d'hemocultiu per microorganismes anaerobis (bacteris anaerobis estrictes).

Alguns conté un mitjà de cultiu líquid i altres contenen un mitjà de cultiu sòlid i líquid a el mateix temps. També hi amb partícules de carbó activat.

procediment

Recomanacions per a la presa de mostra

- La mostra de ser presa per personal altament capacitat i entrenat en l'àrea de microbiologia.

- L'asèpsia o neteja exhaustiva de el lloc de la presa de mostra és sens dubte el pas més important.

- Com tota presa de mostra el personal de salut ha de complir a cabalidad les mesures de bioseguretat durant el procés, (ús de guants, bata, lents, entre d'altres).

- Tenir cura que tots els implements necessaris per a la presa de mostres estiguin disponibles.

- Retolar els flascons amb el nom complet de l'pacient, data, número d'història clínica, hora de presa de mostra i de seqüència de laboratori.

-El ideal és prendre la mostra abans que el pacient comenci una teràpia antimicrobiana. Només està indicat en el cas que se sospiti el no funcionament el tractament en curs. En aquest cas s'ha de prendre la mostra abans de l'canvi de fàrmac, utilitzant flascons d'hemocultius amb inhibidors d'antibiòtics (partícules de carbó activat).

- S'han de prendre mínim 2 mostres en llocs anatòmics diferents, com ara braç dret i braç esquerre. En sospita d'endocarditis es recomanen 3 mostres. A cada mostra s'inclouran 2 flascons (un aerobiosi i un altre d'anaerobiosi).

Quantitat de mostra

La quantitat de mostra varia d'acord a l'edat de l'pacient, però sempre s'ha de mantenir la relació 1: 5 a 1:10 respecte de la dilució sang / brou de cultiu.

En nounats, la quantitat de mostra recomanada és d'1 ml de sang per cada flascó. S'usa flascó pediàtric.

En el cas de lactants entre un mes i un any es pot augmentar a 1,5 ml de sang per cada flascó. S'usa flascó pediàtric.

En nens majors de 2 anys la quantitat de mostra apropiada és de 2,5 ml de sang per flascó. S'usa flascó pediàtric.

A partir de l'adolescència es pot augmentar a un volum de sang entre 5 - 10 ml per flascó. S'usa flascó d'adult.

Finalment en l'etapa adulta la quantitat necessària és de 8-10 ml per flascó. S'usa flascó d'adult.

Presa de mostra

- La mostra de sang pot ser venosa o arterial. No obstant això es pren arterial només quan sigui impossible la presa de mostra venosa.

- No és recomanable prendre la mostra d'un catèter venós central llevat que:

1. Sigui impossible prendre la mostra de forma perifèrica (venosa o arterial).
2. Pacients amb risc d'hemorràgies.
3. Quan el metge sospiti bacterièmia per contaminació de l'catèter venós central.
4. Quan la febre reaparegui després d'un cessament febril de 4 a 5 dies, independentment de si el pacient estigui o no en tractament amb antimicrobià.

Asèpsia abans de la presa de mostra

- Escollir els llocs anatòmics de la presa de mostra. Generalment es trien les venes de millor calibre (vena basílica o cefàlica).

- Segons el Centers for Disease Control (CDC) d'Atlanta (EUA), l'operador s'ha de rentar les mans amb clorhexidina a el 2% o povidona iodada a el 10% abans de la presa de mostra, a més d'usar guants.

-Palpar i ubicar la vena que es va a utilitzar.

-Netejar la zona de punció de forma rotativa, fent moviments de centre cap a fora utilitzant clorhexidina sabonosa o sabó antisèptic. Esbandir amb solució salina estèril.

Posteriorment, aplicar un antisèptic i deixar actuar. Exemple gluconat de clorhexidina 0,5% per 1 minut o povidona iodada 10% per 2 minuts. Per a aquest últim preguntar primer si el pacient és al·lèrgic a l'iode. Si és al·lèrgic es pot substituir per alcohol a l'70%.

Extracció de la mostra

- Col·locar el torniquet per exacerbar el flux sanguini i brollar la vena.

- No tornar a tocar la zona de punció amb el dit. Si això fos estrictament necessari s'ha de rentar el dit de la mateixa manera a l'àrea de punció.

Introduir l'agulla de la inyectadora o el scalp a la vena i extreure la quantitat necessària de sang.

-No col·locar cotó o gasa sobre l'agulla a l'treure-si aquesta no està estèril.

-Treure el precinte de seguretat dels flascons amb molta cura i sense tocar el tap. Alguns autors recomanen realitzar una desinfecció de el tap abans d'inocular la mostra.

- Distribuir la quantitat de sang adequada en els flascons. Si la mostra es pren amb inyectadora primer s'aboca la quantitat necessària sobre el pot de anaerobis i posteriorment en el pot de aerobis. Si la presa es realitza amb scalp (papallona) s'aboca de forma contrària.

- Barrejar el pot de hemocultiu amb suavitat per inversió.

- Canviar-se els guants i repetir els passos anteriors per a la segona presa de mostra.

-Si la segona mostra és presa d'un lloc diferent es pot realitzar immediatament, però si és de al mateix lloc s'ha d'esperar entre 30 a 90 minuts entre una mostra i una altra.

- La mostra ha de ser portada a laboratori el més aviat possible, si això no fos possible s'ha de deixar a temperatura ambient fins a un màxim de 18 hores.

cultiu

Un cop al laboratori els flascons s'incuben a 37 ° C sota les condicions de cada flascó, és a dir, en aerobiosi i anaerobiosi respectivament.

Sota el mètode manual s'ha d'iniciar repic a les 24 hores d'incubació i després repicar de forma interdiaria. Els repics es realitzen de la següent manera: primer es desinfecta el tap de l'ampolleta i s'introdueix l'agulla d'una inyectadora estèril. S'extreu líquid de l'flascó i sembra en agar sang i agar xocolata.

Si hi ha creixement se li realitza un Gram, subcultius en mitjans específics, proves bioquímiques i antibiograma.

En mètodes automatitzats l'equip Bact / Alert emet una alarma quan detecta que un pot està positiu. De la mateixa manera s'ha de repicar en agar sang i agar xocolata.

Un altre mètode que s'està imposant és el d'analitzar el flascó a les 6 hores d'incubació a través d'espectrometria de masses. Aquest mètode ha ajudat a augmentar la sensibilitat i la rapidesa de la diagnosi.

resultats

Mentre el pot de hemocultiu estigui negatiu es poden lliurar informes preliminars intermediaris a el metge tractant. En l'informe s'indica que va negatiu en les hores que porta d'incubació. Per exemple, si va negatiu fins al quart dia, es reportarà de la següent manera:

Resultat preliminar: cultiu negatiu a les 96 hores d'incubació.

Nota: l'estudi continua fins a completar 240 hores.

Si l'hemocultiu dóna positiu s'informa immediatament a el metge tractant i s'envia un informe amb al menys el gram de la colònia. exemple:

Resultat preliminar: en cultiu positiu a les 48 hores d'incubació, a l'gram se li s'observen bacils gram negatius i oxidasa negativa. La identificació i prova de sensibilitat estan en procés.

Aquesta dada s'orienta a el metge tractant per iniciar una teràpia empírica cap al possible microorganisme, mentre espera el resultat final de laboratori.

A l'completar l'estudi bacteriològic, és a dir, s'hagi identificat el microorganisme i es tingui el antibiograma, s'ha d'enviar l'informe final el més aviat possible.

S'ha de tenir especial cura si el microorganisme que es busca és Neisseria gonorrhoeae o Neisseria meningitidis, ja que aquests bacteris s'inhibeixen en presència d'altes concentracions de polianetolsulfonato de sodi (sodium polyanethosulfonate SPS).

És per això que, aquest compost no ha d'excedir de 0.025% en els flascons de hemocultius.

D'altra banda, si la mostra per hemocultiu és primer presa en tubs Vacutainer, aquests tubs tenen concentracions de SPS tòxiques per meningococs i gonococs de manera que la sang ha de transferir abans d'1 hora a el sistema de cultiu en brou.

Com saber si un hemocultiu està positiu o és contaminació

Un hemocultiu es considera contaminat quan hi hagi creixement en només un flascó de hemocultiu de l'total pres. I la sospita de contaminació augmenta si el microorganisme aïllat és microbiota habitual de pell: exemple: Staphylococcus coagulasa negativa, Propionibacterium spp, entre d'altres.

No obstant això, en pacients immunocompromesos no s'ha de menysprear cap microorganisme, però en aquest cas el microorganisme ha d'aparèixer en diverses mostres.

D'altra banda, si la sensibilitat als antibiòtics d'un mateix microorganisme aïllat en dues preses de mostres diferents coincideix, la infecció és real.

Una altra característica és la càrrega bacteriana, ja que els hemocultius contaminats creixen tardanament, mentre que les infeccions reals en pacients no tractats generalment estan positives a les 14 hores d'incubació quan el microorganisme és no empipador.

En canvi, en pacients tractats amb antimicrobians el microorganisme involucrat pot trigar a créixer a causa de que la càrrega és molt baixa.

L'aparició de més d'un microorganisme pot suggerir contaminació, però si es repeteix el mateix resultat en diverses preses de llocs diferents, llavors és real.

referències

1. «Hemocultiu.» Viquipèdia L'enciclopèdia lliure. 3 jul 2019, 17:28 UTC. 14 jul 2019, 19:05 es.wikipedia.org
2. Hervé B. Noves tecnologies en diagnòstic microbiològic: automatització i algunes aplicacions en identificació microbiana i estudi de susceptibilitat. Rev. Med. Clin. Comtes. 2015; 26 (6) 753-763. Disponible a: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. Capítol 20: Sèpsia i risc de malaltia cardiovascular. Salut cardiovascular. pp 187-194. Disponible a: fbbva.es
4. Sánchez R, Racó B, Cortés C, Fernández E, Penya S, Heras EM Hemocultius: Què t'han explicat i què fas? Enferm. globus. 2012; 11 (26): 146-163. Disponible a: scielo.isc
5. Pardines-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Probabilitat d'èxit d'obtenir un hemocultiu positiu. Med. Interna Méx. 2017; 33 (1): 28-40. Disponible a: scielo.org