- procediment
- procediment tècnic
- Per a què serveix la bacil·loscòpia?
- bacil·loscòpia negativa
- bacil·loscòpia positiva
- referències
La bacil·loscòpia és una eina de diagnòstic per a la tuberculosi pulmonar activa. És una tècnica de laboratori que permet detectar i mesurar els bacils àcid-alcohol resistents com Mycobacterium tuberculosi. És el mètode més utilitzat a nivell mundial per fer el diagnòstic de tuberculosi pulmonar activa en la comunitat i per avaluar els beneficis de l'tractament.
La tuberculosi pulmonar és una malaltia infecciosa contagiosa causada per Mycobacterium tuberculosi que infecta als pulmons, però que pot afectar altres òrgans i sistemes. A nivell mundial més de 6 milions de persones pateixen de tuberculosi pulmonar (TBC).
Cèl·lules de M. tuberculosi en un frotis d'esput (Font: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) via Wikimedia Commons)
Mycobacterium tuberculosi i altres espècies de Mycobacterium no tuberculosos posseeixen un embolcall lipídic a la paret cel·lular que és rica en àcid micólico, la qual és resistent a la decoloració amb alcohol àcid després de la tinció amb tints bàsics.
Per això s'utilitzen mètodes especials de tinció com el mètode de Ziehl-Neelsen. Aquests mètodes, senzills i econòmics, permeten que la paret retingui la tinció a l'esbandir-se la mostra amb una solució àcida i la paret dels Mycobacterium adquireix una coloració vermella en contraposició a les altres bacteris que es pinten de blau.
Per fer una bacil·loscòpia es requereix d'una mostra d'esput pres preferiblement al matí a l'aixecar-se. També poden utilitzar mostres tissulars o mostres de fluids corporals.
procediment
Les mostres que es van a processar per a la bacil·loscòpia són mostres d'esput, mostres de teixit o mostres de fluids corporals. Les mostres de teixit poden ser extretes per broncoscòpia o per biòpsies de nòduls limfàtics o altres teixits.
Com la tuberculosi pot afectar qualsevol òrgan o sistema, les mostres poden ser molt variades, entre elles es poden examinar: mostres d'orina, de líquid cefaloraquidi, de líquid pleural, de líquid ascític, de sang, de pus procedent de cavitats obertes, biòpsies, etc.
Les mostres de lesions extrapulmonars han de processar també per a cultiu. Les mostres d'esput es recullen en hores matinals a l'aixecar-se.
Es poden col·lectar diverses mostres seguides o en dies consecutius. Les mostres han d'estar etiquetades en flascons tancats i de boca ampla. Han de tenir les dades de l'pacient, el tipus de mostra i la data de la presa de mostra.
procediment tècnic
- Un cop obtinguda la mostra aquesta pot centrifugar per concentrar-se o utilitzar-se directament. El procediment inicial consisteix a col·locar unes gotes de la mostra i estendre-sobre una làmina portaobjeto.
- La mostra es cobreix amb fucsina filtrada (solució colorant).
- Després s'escalfa fins a obtenir unes tres emissions de vapor blanquinós.
- S'espera cinc minuts perquè es refredi la mostra i es renta amb aigua.
- Es cobreix amb solució decolorant (alcohol àcid) per un període de 2 minuts.
- Es torna a rentar amb aigua.
- Es cobreix la mostra amb blau de metilè i es deixa reposar per un minut.
- Es renta amb aigua.
- Es deixa assecar a l'aire i es procedeix a l'observació al microscopi.
Fotografia d'un microscopi (Imatge de Konstantin Kolosov a www.pixabay.com)
Aquest procediment és ràpid, senzill, econòmic i permet tenyir de vermell a les cèl·lules de Mycobacterium tuberculosi. Aquesta tècnica rep el nom de tècnica de tinció de Ziehl-Neelsen.
L'observació microscòpica consisteix a identificar la presència de bacils alcohol àcid resistents i la quantificació per camp.
Les cèl·lules de Mycobacterium tuberculosi s'observen com bastonets corbs d'aspecte granulós i de color vermell en un fons blau. Poden estar aïllats, rodolins o agrupats. L'observació s'ha de fer per camps i han d'examinar-almenys 100 camps per cada frotis.
El resultat es considera positiu quan existeixen, en cada camp, més de 10 cèl·lules de M. tuberculosis. Això correspon de 5000 a 100.00 bacils per cada mil·lilitre de mostra.
En aquests casos es considera positiu per Mycobacterium tuberculosi, ja que els Mycobacterium no tuberculosos o altres bacteris alcohol àcid resistents tenen formes diferents i generalment la quantitat observada per camp és menor a 10.
La persona que examina la mostra ha de tenir experiència o perícia en la detecció i el reconeixement d'aquests microorganismes, ja que en els resultats poden existir falsos negatius o falsos positius.
Hi ha altres tècniques fluoroscópicas que són més sensibles, però molt més costoses. Una d'aquestes tècniques utilitza la tinció de Auramina-O, per obtenir una fluorescència verda, o la tinció amb Auramina O / Rhodamine B, per observar una fluorescència groga / taronja.
Els casos positius generalment es duen a cultiu i antibiograma per confirmar el diagnòstic i la selecció adequada de l'tractament.
Per a què serveix la bacil·loscòpia?
La tuberculosi és una malaltia infecciosa que afecta el pulmó i altres òrgans i sistemes orgànics corporals. És una malaltia contagiosa que produeix lesions greus en el sistema respiratori que, de no ser tractades adequadament, poden provocar la mort de l'pacient.
La tuberculosi es transmet, gairebé exclusivament, a través de gotes suspeses en l'aire procedents de l'expectoració d'un pacient infectat amb tuberculosi pulmonar. Aquestes petites gotes poden romandre en l'aire i té la capacitat d'infectar a aquella persona que les inhali.
Cèl·lules de M. tuberculosis (Font: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) via Wikimedia Commons)
La infecció requereix un temps prolongat de contacte amb un pacient infectat que contínuament expectorar bacils en un ambient pobrament ventilat. Les persones amb immunodeficiències tenen una major propensió a infectar-se.
Els pacients amb VIH són més propensos que la resta de la població a contraure infeccions respiratòries greus, entre elles la tuberculosi pulmonar. D'allí la importància que té la bacil·loscòpia com a mètode de diagnòstic ràpid i econòmic per a la tuberculosi.
La bacil·loscòpia permet fer el diagnòstic bacteriològic de la tuberculosi, però, un resultat positiu ha de confirmar-se amb altres estudis.
Entre els estudis que permeten confirmar el diagnòstic de tuberculosi hi ha els exàmens radiològics que mostrin imatges característiques en els lòbuls superiors de l'pulmó, les proves de tuberculina positives i els cultius de mostres positives.
bacil·loscòpia negativa
Una bacil·loscòpia negativa no descarta necessàriament el diagnòstic de tuberculosi, ja que sobretot quan la mostra és d'esput, l'eliminació de bacils no és constant. Per això en aquests casos, quan es té la sospita diagnòstica, són necessàries les mostres seriades.
bacil·loscòpia positiva
La bacil·loscòpia positiva és indicativa de tuberculosi i s'ha de confirmar amb altres estudis complementaris. Sempre que el resultat és positiu s'ha de fer un cultiu i antibiograma.
Un cop instaurat el tractament, una disminució sostinguda de l'escala de positivitat de la bacil·loscòpia fins a obtenir resultats negatius, permet controlar les bondats de l'tractament.
referències
- Aziz, MA (2002). External quality assessment for AFB smear microscopy.
- Desikan, P. (2013). Sputum smear microscopy in tuberculosi: is it still rellevant ?. The Indian journal of medical research, 137 (3), 442.
- Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL, & Loscalzo, J. (2012). Harrison 's principles of internal medicine (Vol. 2012). DL Longo (Ed.). New York: Mcgraw-hill.
- Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mútua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… & Muvunyi, CM (2016). Diagnostic performance of smear microscopy and incremental yield of Xpert in detection of Pulmonary tuberculosi in Rwanda. BMC Infectious Diseases, 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosarys, MM, Díaz, R., & Mederos, LM (2016). Importance of quality control of bacilloscopy in Laboratories that perform diagnosi of tuberculosi. Revista xilena de infectologia: òrgan oficial de la Societat Xilena d'Infectología, 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). Manual per al diagnòstic bacteriològic de la tuberculosi: normes i guia tècnica: part 1 bacil·loscòpia. In Manual per al diagnòstic bacteriològic de la tuberculosi: normes i guia tècnica: part 1 bacil·loscòpia (pp. 64-64).